נוגדנים ראשוניים

נוגדנים ראשוניים מיוצרים בשתי צורות. נוגדנים פוליקלונליים הינם תערובת של קלונים המזהים אפיטופים שונים באותו אנטיגן. הם מספקים אות חזק וסובלניים לשינויי קונפורמציה, אך מתאפיינים בשונות בין אצוות (Lots). נוגדנים מונוקלונליים מופקים מקלון יחיד, ומספקים הדירות גבוהה ורקע נמוך. גרסאות רקומביננטיות שלהם מבטלות בנוסף את התלות בייצור מתמשך בבעלי חיים.

ההתאמה נגזרת מהיישום ומהמערכת הנבדקת: יש לוודא ריאקטיביות לאורגניזם המבוקש, ושהאפיטופ נגיש בתנאי ההכנה — לדוגמה, דנטורציה ב-Western Blot לעומת שחזור אנטיגן (Antigen Retrieval) ברקמה משומרת. בנוסף, המארח (Host) והאיזוטיפ צריכים לאפשר שילוב עם נוגדנים נוספים בצביעות מרובות (Multiplexing). גרסאות המסומנות מראש לפלואורופור או ל-HRP חוסכות שלב בעבודה, אך מגבילות את גמישות הניסוי.

לפני רכישה כדאי לקרוא את נתוני הוולידציה עצמם ולא רק את רשימת היישומים: תמונת בלוט מלאה ולא חתוכה, בקרות knockout או knockdown, וריכוז עבודה מומלץ לכל יישום. כדאי לבדוק אם מדובר בקלון ייחודי או בקלון שמשווק תחת כמה מספרי קטלוג, ולוודא זמינות של אותו לוט להמשך הפרויקט ותנאי משלוח מקוררים.